دوره 23، شماره 5 - ( دو ماهنامه طب جنوب 1399 )
جلد 23 شماره 5 صفحات 454-442 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Alishahi A, Zargar M, Ghaemi A, Fotouhi F, Zolfaghari M R. Design, Production, and Evaluation of Virosomes from H1N1 Influenza Virus. Iran South Med J 2020; 23 (5) :442-454
URL: http://ismj.bpums.ac.ir/article-1-1350-fa.html
URL: http://ismj.bpums.ac.ir/article-1-1350-fa.html
علیشاهی آزاده، زرگر محسن، قائمی امیر، فتوحی فاطمه، ذوالفقاری محمدرضا. طراحی، تولید و ارزیابی وایروزوم از ویروس آنفلوانزا ساب تایپ H1N1. مجله طب جنوب. 1399; 23 (5) :442-454
آزاده علیشاهی1 
، محسن زرگر1 ، امیر قائمی* 2، فاطمه فتوحی3 ، محمدرضا ذوالفقاری1
، محسن زرگر1 ، امیر قائمی* 2، فاطمه فتوحی3 ، محمدرضا ذوالفقاری1
1- گروه میکروب‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی قم، قم، ایران
2- بخش آنفلوانزا و ویروس‌های تنفسی شایع، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران ، a_ghaem@pasteur.ac.ir
3- بخش آنفلوانزا و ویروس‌های تنفسی شایع، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
2- بخش آنفلوانزا و ویروس‌های تنفسی شایع، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران ، a_ghaem@pasteur.ac.ir
3- بخش آنفلوانزا و ویروس‌های تنفسی شایع، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
چکیده: (2408 مشاهده)
زمینه: در دو دهه گذشته، اولین نسل از وایروزوم‌های آنفلوانزا گسترش پیدا کرد. وایروزوم‌های آنفلوانزا به‌دلیل کاربرد آن‌ها در زمینه‌های مختلف پزشکی به‌عنوان ابزاری نوین در برنامههای ساخت واکسن و ایمونوتراپی به حساب می‌آیند. هدف از مطالعه حاضر، ساخت وایروزوم کاتیونیک مشتق شده از ویروس آنفلوانزا با استفاده از دترجنت با قابلیت دیالیز (DCPC) و لیپید کاتیونیک (DOTAP) در شرایط آزمایشگاهی میباشد.
مواد و روش‌ها: ویروس آنفلوانزا سویه (H1N1)A/Puerto Rico/8/34 در رده سلولی اپیتلیال کلیه سگ سانان تکثیر داده شد. پوشش ویروس آنفلوانزا با استفاده از DCPC به‌عنوان یک دترجنت حل گردید و با استفاده از دیالیز، این دترجنت حذف شده و با افزودن لیپید کاتیونیک DOTAP، وایروزوم کاتیونیک سنتز شد. میزان سمیت سلولی وایروزوم سنتز شده با روش MTT مورد ارزیابی قرار گرفت و حضور پروتئینهای هماگلوتنین و نورآمینیداز با استفاده SDS-PAGE مورد بررسی قرار گرفت. مورفولوژی وایروزوم ساخته شده از طریق میکروسکوپ عبوری بررسی شد.
یافته‌ها: غلظت نهایی وایروزوم ساخته شده، 5/1 میلی‌گرم در میلی‌لیتر بود. با استفاده از SDS-PAGE، حضور پروتئینهای هماگلوتینین و نورآمینیداز تأیید شد. همچنین در مقایسه با گروه کنترل، سایتوتوکسیسیته پس از 48 ساعت از تیمار با غلظت‌های مختلف وایروزوم کاهش معنی‌داری داشت (05/0p<).
نتیجه‌گیری: استفاده از دترجنت DCPC و همچنین لیپید کاتیونیک DOTAP یک روش مؤثر در بازآرایی پوشش ویروس آنفلوانزا بدون ایجاد تغییرات در گلیکوپروتئین‌های سطحی ویروس میباشد. روش به کار رفته در تحقیق حاضر برای تولید وایروزوم، پتانسیل مناسبی در برنامههای طراحی واکسن آنفلوانزا در آینده خواهد داشت.
مواد و روش‌ها: ویروس آنفلوانزا سویه (H1N1)A/Puerto Rico/8/34 در رده سلولی اپیتلیال کلیه سگ سانان تکثیر داده شد. پوشش ویروس آنفلوانزا با استفاده از DCPC به‌عنوان یک دترجنت حل گردید و با استفاده از دیالیز، این دترجنت حذف شده و با افزودن لیپید کاتیونیک DOTAP، وایروزوم کاتیونیک سنتز شد. میزان سمیت سلولی وایروزوم سنتز شده با روش MTT مورد ارزیابی قرار گرفت و حضور پروتئینهای هماگلوتنین و نورآمینیداز با استفاده SDS-PAGE مورد بررسی قرار گرفت. مورفولوژی وایروزوم ساخته شده از طریق میکروسکوپ عبوری بررسی شد.
یافته‌ها: غلظت نهایی وایروزوم ساخته شده، 5/1 میلی‌گرم در میلی‌لیتر بود. با استفاده از SDS-PAGE، حضور پروتئینهای هماگلوتینین و نورآمینیداز تأیید شد. همچنین در مقایسه با گروه کنترل، سایتوتوکسیسیته پس از 48 ساعت از تیمار با غلظت‌های مختلف وایروزوم کاهش معنی‌داری داشت (05/0p<).
نتیجه‌گیری: استفاده از دترجنت DCPC و همچنین لیپید کاتیونیک DOTAP یک روش مؤثر در بازآرایی پوشش ویروس آنفلوانزا بدون ایجاد تغییرات در گلیکوپروتئین‌های سطحی ویروس میباشد. روش به کار رفته در تحقیق حاضر برای تولید وایروزوم، پتانسیل مناسبی در برنامههای طراحی واکسن آنفلوانزا در آینده خواهد داشت.
نوع مطالعه: پژوهشي |
موضوع مقاله:
میکروب‌شناسی و ایمنولوژی
دریافت: 1398/12/20 | پذیرش: 1399/4/17 | انتشار: 1399/8/17
دریافت: 1398/12/20 | پذیرش: 1399/4/17 | انتشار: 1399/8/17
فهرست منابع
1. Rabieian P, Zareei N, Abbaszadeh M, et al. Survey of Hematologic Markers of Influenza in Bushehr. Iran South Med J 2016; 19(5): 888-94. (Persian) [DOI:10.18869/acadpub.ismj.19.5.888]
2. Paget J, Spreeuwenberg P, Charu V, et al. Global Mortality Associated With Seasonal Influenza Epidemics: New Burden Estimates And Predictors From The Glamor Project. J Glob Health 2019; 9(2): 020421. [DOI:10.7189/jogh.09.020421]
3. Kreijtz JH, Fouchier RA, Rimmelzwaan GF. Immune Responses To Influenza Virus Infection. Virus Res 2011; 162(1-2): 19-30. [DOI:10.1016/j.virusres.2011.09.022]
4. Müllbacher A, Ada G, Tha Hla R. Gamma‐ Irradiated Influenza A Virus Can Prime For A Cross‐Reactive And Cross‐Protective Immune Response Against Influenza A Viruses. Immunol Cell Biol 1988; 66(2): 153-7. [DOI:10.1038/icb.1988.19]
5. Babb R, Chan J, Khairat JE, et al. GammaIrradiated Influenza A Virus Provides Adjuvant Activity To A Co-Administered Poorly Immunogenic SFV Vaccine In Mice. Front Immunol 2014; 5: 267. [DOI:10.3389/fimmu.2014.00267]
6. Furuya Y, Regner M, Lobigs M, et al. Effect Of Inactivation Method On The Cross-Protective Immunity Induced By Whole 'Killed'influenza A Viruses And Commercial Vaccine Preparations. J Gen Virol 2010; 91(6): 1450-60. [DOI:10.1099/vir.0.018168-0]
7. Wilschut J, Mcelhaney J, Palache A. Rapid Reference Influenza. 2nd ed. London: Elsevier Health Sciences, 2006.
8. Babar MM, Sadaf Zaidi N, Kazi AG, et al. Virosomes-Hybrid Drug Delivery Systems. J Antivir Antiretrovir 2013; 5(7): 166-72.
9. Sercombe L, Veerati T, Moheimani F, et al. Advances And Challenges Of Liposome Assisted Drug Delivery. Front Pharmacol 2015; 6: 286. [DOI:10.3389/fphar.2015.00286]
10. Jennings GT, Bachmann MF. The Coming Of Age Of Virus-Like Particle Vaccines. Biol Chem 2008; 389(5): 521-36. [DOI:10.1515/BC.2008.064]
11. Kalra N, Dhanya V, Saini V, et al. Virosomes: As A Drug Delivery Carrier. Am J Adv Drug Deliv 2013; 1(1): 29-35.
12. Mischler R, Metcalfe IC. Inflexal® V a Trivalent Virosome Subunit Influenza Vaccine: Production. Vaccine 2002; 20(Suppl 5): B17-23. [DOI:10.1016/S0264-410X(02)00512-1]
13. Moser C, Amacker M, Kammer AR, et al. Influenza Virosomes As A Combined Vaccine Carrier And Adjuvant System For Prophylactic And Therapeutic Immunizations. Expert Rev Vaccines 2007; 6(5): 711-21. [DOI:10.1586/14760584.6.5.711]
14. Cusi MG. Applications Of Influenza Virosomes As A Delivery System. Hum Vaccin 2006; 2(1): 1-7. [DOI:10.4161/hv.2.1.2494]
15. Huckriede A, Bungener L, Stegmann T, et al. The Virosome Concept For Influenza Vaccines. Vaccine 2005; 23(Suppl 1): S26-38. [DOI:10.1016/j.vaccine.2005.04.026]
16. Cryz SJ, Glück R. Immunopotentiating Reconstituted Influenza Virosomes As A Novel Antigen Delivery System. Dev Biol Stand 1998; 92: 219-23.
17. González-Jara P, Fraile A, Canto T, et al. The Multiplicity Of Infection Of A Plant Virus Varies During Colonization Of Its Eukaryotic Host. J Virol 2009; 83(15): 7487-94. [DOI:10.1128/JVI.00636-09]
18. Wickramasinghe S, Kalbfuss B, Zimmermann A, et al. Tangential Flow Microfiltration And Ultrafiltration For Human Influenza A Virus Concentration And Purification. Biotechnol Bioeng 2005; 92(2): 199-208. [DOI:10.1002/bit.20599]
19. Kalbfuss B, Genzel Y, Wolff M, et al. Harvesting And Concentration Of Human Influenza A Virus Produced In Serum‐Free Mammalian Cell Culture For The Production Of Vaccines. Biotechnol Bioeng 2007; 97(1): 73-85. [DOI:10.1002/bit.21139]
20. Killian ML. Hemagglutination Assay For Influenza Virus. In: Spackman E, editors. New York: Humana Press-Animal Influenza Virus, 2014, 3-9. [DOI:10.1007/978-1-4939-0758-8_1]
21. De Jonge J, Leenhouts JM, Holtrop M, et al. Cellular Gene Transfer Mediated By Influenza Virosomes With Encapsulated Plasmid DNA. Biochem J 2007; 405(1): 41-9. [DOI:10.1042/BJ20061756]
22. Lowry OH, Rosebrough NJ, Farr AL, et al. Protein Measurement With The Folin Phenol Reagent. J Biol Chem 1951; 193(1): 265-75. [DOI:10.1016/S0021-9258(19)52451-6]
23. Peterson GL. A Simplification Of The Protein Assay Method Of Lowry Et Al. Which Is More Generally Applicable. Anal Biochem 1977; 83(2): 346-56. [DOI:10.1016/0003-2697(77)90043-4]
24. Mosmann T. Rapid Colorimetric Assay For Cellular Growth And Survival: Application To Proliferation And Cytotoxicity Assays. J Immunol Methods 1983; 65(1-2): 55-63. [DOI:10.1016/0022-1759(83)90303-4]
25. Laemmli U. Most Commonly Used Discontinuous Buffer System For SDS Electrophoresis. Nature 1970; 227: 680-6. [DOI:10.1038/227680a0]
26. Beg S, Samad A, Nazish I, et al. Colloidal Drug Delivery Systems In Vaccine Delivery. Curr Drug Targets 2013; 14(1): 123-37. [DOI:10.2174/138945013804806523]
27. Schwendener RA. Liposomes As Vaccine Delivery Systems: A Review Of The Recent Advances. Ther Adv Vaccines 2014; 2(6): 159-82. [DOI:10.1177/2051013614541440]
28. Paternostre M, Viard M, Meyer O, et al. Solubilization And Reconstitution Of Vesicular Stomatitis Virus Envelope Using Octylglucoside. Biophys J 1997; 72(4): 1683-94. [DOI:10.1016/S0006-3495(97)78814-3]
29. Paternostre MT, Lowy RJ, Blumenthal R. pH‐ Dependent Fusion Of Reconstituted Vesicular Stomatitis Virus Envelopes With Vero Cells Measurement By Dequenching Of Fluorescence. FEBS Lett 1989; 243(2): 251-8. [DOI:10.1016/0014-5793(89)80139-5]
30. Mohammadzadeh Y, Gholami S, Rasouli N, et al. Introduction Of Cationic Virosome Derived From Vesicular Stomatitis Virus As A Novel Gene Delivery System For sf9 Cells. J Liposome Res 2017; 27(2): 83-9. [DOI:10.3109/08982104.2016.1144205]
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
