1- گروه زیستشناسی، دانشکده علوم، دانشگاه ارومیه گروه زیست فناوری سلولی و مولکولی، پژوهشکده زیست فناوری، دانشگاه ارومیه 2- گروه زیستشناسی، دانشکده علوم، دانشگاه ارومیه گروه زیست فناوری سلولی و مولکولی، پژوهشکده زیست فناوری، دانشگاه ارومیه ، m.sam@urmia.ac.ir 3- گروه زیستشناسی، دانشکده علوم، دانشگاه ارومیه 4- گروه ژنتیک مولکولی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران 5- گروه زیستشناسی، دانشکده علوم، دانشگاه فردوسی مشهد 6- گروه ایمونولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه ارومیه
چکیده: (6887 مشاهده)
زمینه:سلولهای بنیادی مزانشیمی هدف مناسبی جهت سلول درمانی و ژن درمانی بیماران هموفیلی B محسوب میشوند. این سلولها دارای ویژگیهای بینظیر از جمله تمایز به طیف وسیعی از سلولهای مختلف و ایمنیزایی اندک در شرایط پیوند میباشند که آنها را برای سلول درمانی و ژن درمانی مناسب کرده است. بیان اندک ترانس ژن از مشکلات ژن درمانی است. با شناسایی توالیهای تنظیمی و استفاده از آنها در موقعیتهای مناسب در ناقلین میتوان در جهت بهبود بیان ژن با هدف ژن درمانی اقدام نمود. در این بررسی، 4 ناقل پلاسمیدی فاکتور 9 فاقد و واجد اینترونهای ژن بتاگلوبین به درون سلولهای مزانشیمی ترانسفکت گردیدند. هدف این پژوهش بررسی توانایی این سلولها در بیان فاکتور 9 بود. مواد و روشها: پس از جداسازی سلولهای بنیادی مزانشیمی از استخوان تیبیا و فمور موش رت، فنوتیپ این سلولها با روش فلوسایتومتری تعیین شد. ناقلین پلاسمیدی فاکتور 9 با استفاده از عامل ترانسفکشن به درون سلولهای مزانشیمی وارد شدند. 48 ساعت پس از ترانسفکشن، توانایی سلولهای بنیادی در بیان مینی ژنهای مختلف فاکتور 9 از طریق انجام آزمون ساندویچ الایزا بر روی محیط کشت و آزمون RT-PCR ارزیابی شد. برای تجزیه و تحلیل آماری از نرمافزار SPSS ویرایش 18 استفاده شد. مقایسه میانگین دادهها با استفاده از آزمون آنالیز واریانس یک طرفه (One – Way ANOVA) انجام شد. یافتهها:بالاترین سطح بیان فاکتور 9 از سازه ژنی بدون اینترون و سازه ژنی دارای اینترون 1 ژن بتاگلوبین بهدست آمد.بالاترین میزان فعالیت زیستی از فاکتور9 ترشح شده به محیط کشت از سازه ژنی دارای اینترون 1 و 2 بتا گلوبین بهدست آمد. نتیجهگیری:سلولهای بنیادی مزانشیمی توانائی بیان فاکتور 9 و اسپلایسنگ اینترون 1 ژن بتاگلوبین را نشان دادند. توالیهای اینترونی بتاگلوبین سطح بیان فاکتور 9 را کاهش دادند که این کاهش بیان را میتوان با احتمال به اسپلایسینگ نادرست اینترونها نسبت داد.
Azadbakhsh A, Sam M R, Farrokhi F, Zomorodipour A, Haddad Mashahrizeh A A, Mokarizadeh A. Expression of the human coagulation factor IX in the bone marrow mesenchymal stem cells. Iran South Med J. 2014; 17 (2) :130-140 URL: http://ismj.bpums.ac.ir/article-1-519-fa.html
آزادبخش آزاده سادات، سام محمدرضا، فرخی فرح، زمردیپور علیرضا، حداد مشهد ریزه علی اکبر، مکاریزاده آرام. بررسی بیان مینی ژنهای فاکتور 9 انسانی در سلولهای بنیادی مزانشیمی مغز استخوان. طب جنوب. 1393; 17 (2) :140-130
Iranian South Medical Journal is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License which allows users to read,
copy, distribute and make derivative works for non-commercial purposes from the material, as long as the author of the original work is cited properly