fa بررسی تأثیر افزایش بیان miR-29b1 بر القای آپوپتوز در سلول‌های لوسمی رده سلولی HL60 عمومى General پژوهشي Original <p>زمینه: ریزRNAها، مولکول‌های کوچک تنظیمی غیر رمز کننده هستند که نقش‌های مهمی را در فرآیندهای مختلف زیستی همچون تکثیر، تمایز و آپوپتوزیس ایفا می‌کنند. کاهش بیان miR-29b1 در بسیاری از سرطان‌های انسانی، نشان‌دهنده نقش‌ مهم این مولکول در تکامل بافتی و سرطان است. از آنجایی که القای آپوپتوزیس در سلول‌های سرطانی شاخص مهمی در درمان آن‌هاست، در این مطالعه تأثیر افزایش بیان miR-29b1 با استفاده از ساختار لنتی ویروسی بر القای آپوپتوز در رده سلولی پرومیلوتیک HL60 مورد بررسی قرار گرفته است. مواد و روش‌ها: افزایش بیان پایدار miR-29b1 با استفاده از ساختار لنتی ویروسی حاوی توالی پیش‌ساز miR-29b1 حاصل شد. سپس سلول‌های HL60 تحت تیمار ویروس قرار گرفتند. پس از 48 و 72 ساعت اثر آپوپتوتیک این miRNA، با استفاده از آزمون MTT، رنگ‌آمیزی با اتیدیوم بروماید و آکریدین اورنج، سنجش میزان کاسپاز 3 و فلوسایتومتری انکسین مورد سنجش قرار گرفت. یافته‌ها: نتایج با نرم افزار آماری SPSS ویرایش 13 و آزمون آماری t-test آنالیز شدند. مطابق انتظار، افزایش بیان miR-29b1 باعث افزایش در القای آپوپتوزیس گردید، به‌گونه ای ‌که آپوپتوزیس در گروه آزمون در مقایسه با گروه کنترل حدود 3 برابر افزایش نشان داد. آنالیز داده‌ها نشان از معنی‌دار بودن این افزایش نسبت به گروه کنترل بود (05/0>P). نتیجه‌گیری: بر اساس یافته‌های این بررسی، miR-29b1 می‌تواند آپوپتوزیس را در رده سلولیHL60 القا کند. تحریک آپوپتوزیس به‌وسیله miRNAها می‌تواند یکی از بهترین و مناسب‌ترین راه‌ها برای القای مرگ در سلول‌های سرطانی باشد. نتایج به‌دست آمده از نقش سرکوب‌گری تومور miR-29b1 حمایت می‌کند، به‌گونه‌ای که miR-29b1 صناعی می‌تواند در آینده به‌عنوان یک درمان اپی‌ژنتیک جدید به-کار رود.</p> <p>Background: MicroRNAs are small non-coding regulatory molecules that are involved in diverse biological processes such as proliferation, differentiation and apoptosis. Down regulation of miR-29b1 has been found in some of cancers that indicate important roles of this molecule in histological development and cancer. Whereas induction of apoptosis in cancer cells is important for their therapy, in this study, our goal was to examine the effect of miR-29b1 over-expression on apoptosis using the lentiviral structure in HL60 cell line. Materials and methods: Permanent overexpression of miR-29b1 was established using a lentiviral vector construct containing the precursor of miR-29b1 sequence. Then, HL60 cells treated by miR-29b1 lentivirus. 48 and 72 hours after transduction, cell proliferation inhibition was estimated by MTT assay. Detection of apoptotic cells was evaluated by EtBr/AO double staining technique and flow cytometry using Annexin V and Caspase-3 activity was measured by caspase-3 colorimetric activity assay. Results: Data analysis was done with SPSS 13 softwer and t-test. According to our results, overexpression of miR-29b1 led to increase apoptosis. As apoptosis in the test group compared with the control group showed about 3-fold increase. Data analysis showed a significant increase compared to the control group (P<0.05). Conclusion: According to findings of present study, miR-29b1 can induce apoptosis in HL60 cell line. Apoptosis stimulation by miRNAs is probably one of the best and applicable ways to induce death in cancer cells. These data support a tumor suppressor role of miR-29b1, synthetic miR-29b1 might be used as a novel epigenetic therapy in future.</p> ریز RNA, miR-29b1 , آپوپتوزیس,HL60 , کتور لنتی ویروسی microRNA, miR-29b1, Apoptosis, HL60, lentiviral vector 243 253 http://ismj.bpums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3-453&slc_lang=fa&sid=1 Katayoun Ahmadi کتایون احمدی 570031947532846008908 570031947532846008908 No Department of Genetics, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, IRAN گروه ژنتیک، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران Masoud Soleimani مسعود سلیمانی soleim_m@modares.ac.ir 570031947532846008909 570031947532846008909 Yes Department of Hematology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, IRAN گروه هماتولوژی و بانک خون، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس Saeid Kaviani سعید کاویانی 570031947532846008910 570031947532846008910 No Department of Hematology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, IRAN گروه هماتولوژی و بانک خون، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس Ehsan Arefian احسان عارفیان 570031947532846008911 570031947532846008911 No Department of Molecular Biology and Genetic Engineering, Bon Yakhte Biotechnology Research Center, Tehran, IRAN. گروه ویروس‌شناسی، گروه بیولوژی مولکولی و مهندسی ژنتیک، مرکز تحقیقات فناوری بن‌یاخته، تهران Parviz Fallah پرویز فلاح 570031947532846008912 570031947532846008912 No Department of Hematology, Faculty of Paramedical, Alborz University of Medical Sciences, Alborz, IRAN گروه علوم آزمایشگاهی، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی البرز