fa مقایسه روش PCR با روش استاندارد MPN جهت تشخیص آلودگی باکتریایی در آب شرب عمومى General پژوهشي Original <p>زمینه: تشخیص آلودگی میکروبی آب شرب به‌روش کشت علاوه بر هزینه بری، زمان‌بر بوده و بر حسب میزان آلودگی چند روز به‌طول می‌انجامد. این درحالی است که شهروندان در این زمان از آب مورد بررسی استفاده می‌نمایند. روش‌های ملکولی دارای حساسیت و سرعت عمل بالایی و زمان عملیاتی کمتری هستند. در این تحقیق روش Multiplex PCR جهت ارزیابی سریع میکروبی آب از نظر کلی فرم، Ecoli و تشخیص احتمالی باکتری‌های VBNC در آزمایشگاه باکتریولوژی شرکت آب و فاضلاب استان مرکزی و مرکز تحقیقات سل و عفونی کودکان در فاز عملیاتی اجرا گردید. مواد و روش‌ها: تشخیص سریع کلی فرم با کمک آمپلی فیکاسیون ژن‌های lacZ و uidA در واکنش Multiplex PCR طراحی و اجرا گردید. 80 نمونه آب شرب شهر اراک شامل 41 نمونه چاه، 36 نمونه شبکه و 3 نمونه مخزن در این بررسی جمع‌آوری شده و با استفاده از آمپلی‌فیکاسیون ژن‌های lacZ و uidA مورد آزمایش Multiplex PCR قرار گرفتند. همچنین آزمایش MPN به‌عنوان روشی استاندارد و جهت مقایسه یافته‌ها، روی تمامی نمونه‌ها انجام شد. روش‌های Multiplex PCR و MPNروی باکتری استاندارد، باکتری‌های خالص شده از نمونه‌های MPN مثبت و نیز CRM(Certificated Reference Material، (سویه مرجع) انجام گردیدند. یافته‌ها: در نمونه‌های چاه، شبکه و مخزن، اکثر نمونه‌ها در هر دو روش نتایج مشابه را نشان دادند. نتیجه PCR روی باکتری استاندارد، کشت‌های خالص شده نمونه‌های MPN مثبت و CRM نیز تأیید کننده روش PCR بود. پنج نمونه دارای PCR مثبت و نتیجه MPN منفی گزارش شدند. زمان کل عملیات PCR با تغییر فاکتورها به حدود یکصد و پنج دقیقه کاهش یافت. نتیجه‌گیری: روش Multiplex PCR، امکان شناسایی همزمان باکتری‌های کلی فرم کل و اشرشیاکلی را در آب آشامیدنی فراهم نمود.</p> <p>Background: Detection of bacterial contamination in drinking water by culture method is a time and cost consuming method and spends a few days depending on contamination degree. However, the people use the tap water during that time. Molecular methods are rapid and sensitive. In this study a rapid Multiplex PCR method was used for rapid analysis both coliform bacteria and E.coli, and probable detection of VBNC bacteria in drinking water, the experiments were performed in bacteriological lab of water and Wastewater Corporation in Markazi province. Material and Methods:Amplification of a fragment from each of lacZ and uidA genes in a Multiplex PCR was used for detection of coliforms. Eight samples was taken from Arak drinking water system including 36 samples of wells, 41 samples of water distribution network and 3 samples from water storages were examined by amplification of lacZ and uidA genes in a Multiplex PCR. Equivalently, the MPN test was applied as a standard method for all samples for comparison of results. Standard bacteria, pure bacteria isolated from positive MPN and CRM were examined by PCR and MPN method. Results: The result of most samples water network, water storages, and water well were same in both MPN and PCR method .The results of standard bacteria and pure cultures of bacteria isolated from positive MPN and CRM confirmed the PCR method. Five samples were positive in PCR but negative in MPN method. Duration time of PCR was decreased about 105 min by changing the PCR program and electrophoreses factors. Conclusion: The Multiplex PCR can detect coliform bacteria and E.coli synchronous in drinking water.</p> آب شرب, آلودگی باکتریایی, روشPCR , روش MPN Comparison, PCR method, Bacterial contamination, Drinking water, MPN method 867 878 http://ismj.bpums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3-517&slc_lang=fa&sid=1 Fatemeh Dehghan فاطمه دهقان 570031947532846008720 570031947532846008720 No Department Of Microbiology, Qom Branch, Islamic Azad University, Qom, IRAN<br> Hygiene and Quality Control Office of Markazi Province, Water and Wastewater Company, IRAN دانشگاه آزاد اسلامی، واحد قم، گروه میکروبیولوژی، قم، ایران<br> دفتر کنترل کیفیت و بهداشت شرکت آب و فاضلاب استان مرکزی Mohammad Reza Zolfaghari محمدرضا ذوالفقاری 570031947532846008721 570031947532846008721 No Department Of Microbiology, Qom Branch, Islamic Azad University, Qom, IRAN مرکز تحقیقات سل و عفونی کودکان، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران Mohammad Arjomandzadegan محمد ارجمندزادگان , mmatinam81@yahoo.com arjomandzadegan@arakmu.ac.ir 570031947532846008722 570031947532846008722 Yes Tuberculosis and Pediatric Infectious Diseases Research Center, Arak University of Medical Sciences, Arak, IRAN مرکز تحقیقات سل و عفونی کودکان، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران Somayeh Geravand سمیه گراوند 570031947532846008723 570031947532846008723 No Tuberculosis and Pediatric Infectious Diseases Research Center, Arak University of Medical Sciences, Arak, IRAN مرکز تحقیقات سل و عفونی کودکان، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران GhplamReza Ahmari غلامرضا احمری 570031947532846008724 570031947532846008724 No Hygiene and Quality Control Office of Markazi Province, Water and Wastewater Company, IRAN دفتر کنترل کیفیت و بهداشت شرکت آب و فاضلاب استان مرکزی Salomeh Kalantari سالومه کلانتری 570031947532846008725 570031947532846008725 No Hygiene and Quality Control Office of Markazi Province, Water and Wastewater Company, IRAN دفتر کنترل کیفیت و بهداشت شرکت آب و فاضلاب استان مرکزی Ali Reza Kasravi علیرضا کسروی 570031947532846008726 570031947532846008726 No Department of Microbiology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Arak, IRAN گروه میکروبیولوژی، ‏‏دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم تحقیقات،اراک،ایران