fa ارزیابی شیوع عفونت با سودوموناس ائروژینوزا در بیماران مبتلا به سینوزیت مزمن جراحی شده در بیمارستان رسول اکرم (ص) به روش واکنش زنجیره‌ای پلیمراز میکروب‌شناسی و ایمنولوژی Microbiology and Immunology پژوهشي Original <p>زمینه: سینوزیت مزمن یکی از شایع‌ترین بیماری‌های مزمن است که افراد تمام گروه‌های سنی را تحت‌تاثیر قرار می‌دهد. این بیماری یک فرایند التهابی است که سینوس‌های پارانازال را درگیر می‌کند. در مورد انتشار گونه‌های باکتریایی ایجادکننده این بیماری اطلاعات دقیقی در دسترس نیست. Pseudomonas aeruginosa یکی از پاتوژن‌های مهم در بیماران دارای نقص در سیستم ایمنی می‌باشد. بنابراین این میکروارگانیسم یکی از مهم‌ترین عوامل ایجادکننده سینوزیت مزمن می‌باشد. هدف این مطالعه تشخیص مولکولی سینوزیت‌های ناشی از Pseudomonas aeruginosa می‌باشد. مواد و روش‌ها: پنجاه نمونه‌از ترشحات سینوس‌های فکی و پیشانی بیماران مراجعه‌کننده به بیمارستان رسول اکرم (ص) در هنگام عمل جراحی جمع‌آوری شدند. DNA باکتریایی توسط کیت DNP استخراج شد و با به کاربردن سکانس هدف ژن oprL (پروتئین غشای خارجی) و طراحی پرایمر به تشخیص این باکتری اقدام شد. تست PCR بهینه و سپس حساسیت و اختصاصیت بررسی گردید. محصول تکثیری به روش T/A Cloning کلون و جهت سکانسینگ و کنترل مثبت مورد استفاده واقع شد. یافته‌ها: محصول PCR با اندازه bp 504 به‌طور صحیح تکثیر و بر روی ژل الکتروفورز 5/1 درصد مشاهده و از طریق سکانسینگ تأئید شد. ارزیابی پرایمرهای انتخابی با هشت DNA مختلف، 100 درصد اختصاصیت را نشان داد. حساسیت تست بهینه شده PCR هم cfu10 ارزیابی گردید. از 50 نمونه مورد بررسی، 22 درصد نمونه‌ها از جهت سودوموناس آئروزینوزا مثبت تشخیص داده شد. نتیجه‌گیری: این مطالعه نشان داد که تشخیص مولکولی Pseudomonas aeruginosa با به‌کاربردن ژن هدف oprL یک روش مؤثر و سریع جهت شناسایی سودوموناس آئروزینوزا می‌باشد.</p> <p>Background: Chronic sinusitis(CS) is one of the most prevalent chronic illnesses that affecting persons of all age groups. It is an inflammatory process that involves the paranasal sinuses. There isn&#39;t definitive and consistent data concerning the distribution of bacterial species in patients with Chronic Sinusitis. Pseudomonas aeruginosa has emerged as a potential pathogen in the immunocompromised patients, so this microorganism is one of the most important cause of Chronic sinusitis. The purpose of this study is molecular detection of sinusitis caused by P.aeruginosa. Material and Methods: 50 specimens was provided from the secretion of maxillary and frontal sinuses of patients from Rasoule Akram hospital during operation. Genomic bacterial DNA was extracted by DNP kit and detection of this bacteria was proceeded by employing sequence-specific target namely the outer membrane protein (oprL) gene locus and designing primers. PCR optimized and sensitivity and specificity tests was performed. Amplicon was cloned by T/A Cloning method and was used for sequencing and positive control. Results: The product of optimized PCR with 504 bp length correctly amplified and observed on electrophoreses gel 1.5% and confirmed by sequencing. Evaluation of the selected primers with 8 various DNA demonstrated 100% specificity. Sensitivity of optimized test was Evaluated 10 CFU of bacteria. From the 50 samples, 22% of specimens were positive for P.aeruginosa. Conclusion: This study indicates that molecular detection of P.aeruginosa employing the oprL gene target is a rapid and useful technique for detection of P.aeruginosa.</p> سینوزیت, سودوموناس ائروژینوزا, واکنش زنجیره‌ای پلیمراز, تشخیص مولکولی Sinusitis, Pseudomonas aeruginosa, Polymerase Chain Reaction, Molecular Diagnosis 720 728 http://ismj.bpums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3-623&slc_lang=fa&sid=1 Hania Shafienia هانیه شفیع‌نیا 570031947532846009335 570031947532846009335 No Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University,Tehran, Iran گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران، ایران Mohammad Hasan Shahhosseiny محمدحسن شاه‌حسینی shahosseiny@yahoo.com 570031947532846009336 570031947532846009336 Yes Department of Microbiology, Shahr-e-Qods branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran<br>Iranian Gene Fanavar Institute (IGF), Tehran, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد شهر قدس، تهران، ایران<br>مؤسسه ایرانیان ژن فناور (IGF)، تهران، ایران Mansour Bayat منصور بیات 570031947532846009337 570031947532846009337 No Department of veterinary Mycology , Science and research branch , Islamic Azad university, Tehran,Iran گروه تخصصی قارچ‌شناسی، دانشکده علوم تخصصی دامپزشکی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران، ایران Mohammad amin Mahmoudi محمدامین محمودی 570031947532846009338 570031947532846009338 No Iranian Gene Fanavar Institute (IGF), Tehran, Iran مؤسسه ایرانیان ژن فناور (IGF)، تهران، ایران Mehrdad Rabiei Nematabad مهرداد ربیعی نعمت‌آباد 570031947532846009339 570031947532846009339 No Iranian Gene Fanavar Institute (IGF), Tehran, Iran مؤسسه ایرانیان ژن فناور (IGF)، تهران، ایران Mohammad Farhadi محمد فرهادی 570031947532846009340 570031947532846009340 No Research Center for Diseases of Ear, Nose and Throat, Iran University of Medical Sciences, Tehran, Iran مرکز تحقیقات گوش، گلو، بینی و سر و گردن، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران