fa القاء پاسخ ایمنی هومورال علیه ویروس هرپس سیمپلکس تیپ یک با به کار گیری گلیکوپروتئین نوترکیب D ویروس در موش های BALB/C عمومى General پژوهشي Original <div style="text-align: justify"> یکی از مهمترین گلیکو پروتئین های سطحی ویروس هرپس سیمپلکس تیپ یک (HSV-1)، گلیکو پروتئینD (gpD) است که با داشتن ویژگی آنتی ژنیسیتی و ایمیونوژنیسیتی بالا, باعث القاء پاسخ ایمنی در بدن میزبان می شود. با توجه به شباهت زیادی که بین زنجیر نوکلئوتیدهای ژن کد کننده gpD بین این ویروس و ویروس هرپس سیمپلکس تیپ 2 (HSV-2) وجود دارد، بنابر این کاندیدای مناسبی برای تولید واکسن ریکامبیننت محسوب می شود. در این پژوهش برای تولید gpD نوترکیب ابتدا با کیولوویروس حاوی ژن کامل gpD در یاخته هایSf9 (Spodoptera frugiperda) تکثیر داده و 4-5 روز پس از انکوباسیون، یاخته های آلوده جمع آوری وتحت عمل سونیکاسیون قرار گرفت. پس از اندازه گیری مقدار پروتئین موجود در شیرابه سلولی، در کنار شیرابه حاصل از یاخته های شاهد SDS-PAGE و آنگاه با محلول کوماسی بلو رنگ آمیزی و الگوی الکتروفورز پروتئین ها تعیین شد. در مرحله بعد با انتقال پروتئین های الکتروفورز شده از روی ژل به کاغذ نیتروسلولز و با استفاده از به ترتیب آنتی بادی پلی کلونال اختصاصی، آنتی بادی ضد ایمنوگلوبولین های انسان نشاندار، و سوبسترای مناسب روش وسترن بلاتینگ انجام و صحت وجود gpD نوترکیب تأیید شد. به منظور بررسی ویژگی ایمن زایی gpD نوترکیب تولیدی اقدام به تزریق داخل عضلانی به یک گروه 7 تایی از موش های BALB/c سه هفته ای شد. ضمناً همین تعداد موش نیز برای گروه شاهد و گروه ویروس که به ترتیب با PBS و ویروس حاد مورد تلقیح قرار گرفته بودند, مورد استفاده قرار گرفت. جمعاً 3 تزریق با فواصل 21 روز انجام شد و 21 روز بعد از آخرین تزریق از تمام موش ها خونگیری به عمل آمد. آزمایش خنثی سازی ویروس حاد با استفاده از سرم خون موش های گروههای سه گانه انجام شد و نتایج نشان داد که gpD نوترکیب توانسته بود تا در موش های تزریق شده باعث ایجاد آنتی بادی های خنثی کننده ویروس هرپس سیمپلکس تیپ یک شود. </div> Herpes simple virus type-1 (HSV-1) is a member of the Herpesviridae family. This virus causes a wide range of infections including a symptomatic infections to lethal encephalitis in human beings. There are some 12 different proteins on the viral surface of which 10 are glycosylated. Glycoprotein D (gD) is one of the most important surface glycoprotein with high antigenecity and immunogenicity which induces a potent immunoresponse in the host. Because of similarities between nucleotide sequence of the gD-1 gene and that of the herpes simplex type-2 and even between strains of the HSV-1 therefore, it is regarded as a good candidate for production of recombinant vaccine against HSV-1. In this study baculovirus carrying whole gene sequence of gD-1 was first propagated in Sf9 cells and the infected cells were harvested and sonicated 4-5 days post inoculation. Cell extructs were analysed with SDS-PAGE electrophoresis after being checked for the amount of their protein contents. The electrophoresed proteins were then subjected to Western blotting and a positive result was obtained indicating the presence of the gD-1 in the extracts. Three week old BALB/c mice were inoculated with recombinant gD-1 to evaluate its immunogenicity. Control mice were also inoculated with PBS and sublethal dose of the virus. Three injections with 21 day intervals were given to each group and all mice were bled 21 day after the last injection. Virus neutralization test using sera collected from the mice was done and the results showed that the recombinant gD-1 could induce neutralizing antibody against HSV-1 in the test animals. گلیکوپروتئین D، ایمنوژنیسیتی، هرپس سیمپلکس تیپ یک با کیولوویروس، تست خنثی سازی ویروس glycoprotein D, immunogenicity, HSV-1, Baculovirus, viral neutrilization test 1 10 http://ismj.bpums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3-76&slc_lang=fa&sid=1 Hoorieh Soleiman Jahi حوریه سلیمان جاهی 57003194753284600352 57003194753284600352 Yes Mohammad hasan Roustaee محمد حسن روستایی 57003194753284600353 57003194753284600353 No Mohammad Javad Rasaee محمد جواد رسایی 57003194753284600354 57003194753284600354 No Anooshirvan Kazemnejad انوشیروان کاظم نژاد 57003194753284600355 57003194753284600355 No Zahra Meshkat زهرا مشکات 57003194753284600356 57003194753284600356 No Keyvan Zandi کیوان زندی 57003194753284600357 57003194753284600357 No