Iranian South Medical Journal
مجله طب جنوب
Iran South Med J
Medical Sciences
http://ismj.bpums.ac.ir
57
journal57
1735-4374
1735-6954
10.52547/ismj
fa
jalali
1396
8
1
gregorian
2017
11
1
20
5
online
1
fulltext
fa
تخلیص پروتئین چسبنده fp-2 صدف دریایی بیسالدار (Modiolus sp. PG) از منشاء ساحل شمالی خلیجفارس
Purification of Bysal Mussel (Modiolus sp. PG) Adhesive Protein fp-2 from Nortern Seashore of Persian Gulf
اختلالات سیستمیک- متابولیکی
Disorders of Systemic, Metabolic or Environmental Origin
پژوهشي
Original
<strong><u><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">زمینه</span></span></span></u></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">: دو کفهایهای ماسل، پروتئین</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">های چسبناکی تولید نموده که امکان اتصال موجود به سطوح در محیط</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">های آبی را فراهم می</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">کنند. خواص ویژه نظیر چسبندگی، مقاومت و سازگاری زیستی، کاربرد این پروتئین</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">ها را در مهندسی پزشکی و دندانپزشکی و ساخت چسب</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">های بیولوژیک مطرح نموده است.</span></span></span></strong><br>
<strong><u><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">مواد و روشها</span></span></span></u></strong><strong><u><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:11.0pt;">:</span></span></span></u></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> با توجه به شاخص</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">های مورفولوژیکی و توالی ژن </span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">COI</span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> دوکفهای ماسل (</span></span></span></strong><strong><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">Modiolus sp. PG</span></span></span></em></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">) از منشاء خلیجفارس نمونه</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">گیری شد. به منظور تأئید حضور غده</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">های پلی</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">فنلی مولد مواد پروتئین</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> چسبنده، از بافت پای صدف مقاطع بافتی تهیه شد. سپس پروتئین </span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">fp-2</span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> توسط روشهای کروماتوگرافی تعویض یون با گرادیان نمک و </span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">pH</span></span></span></strong> <strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">و همچنین کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون خالصسازی گردید. جهت اثبات وجود پروتئینها در هر فراکشن از تست </span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">Arnow</span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> و رنگ</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">آمیزی اختصاصی </span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">NBT</span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> استفاده گردید. جهت تشخیص خلوص پروتئین در هر مرحله از تخلیص از الکتروفورز </span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">SDS</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">-</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">PAGE</span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> استفاده شد. پیک</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">های کروماتوگرام دارای پاسخ مثبت نسبت به </span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">NBT</span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> پس از تغلیظ و الکتروفورز (به روش اسید- اوره) آنگاه به کاغذ نیتروسلولز بلات و توسط رنگآمیزی </span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">NBT</span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> تأیید گردید. </span></span></span></strong><br>
<strong><u><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">یافتهها:</span></span></span></u></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> مشخصات گونه</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">شناسی و ریخت</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">شناسی صدف بررسی و با کلیدهای شناسایی </span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">FAO</span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> و کتاب نرم</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">تنان سواحل خلیج</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">فارس ایران تطبیق گردید. نمونه مورد مطالعه متعلق به خانواده </span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">Mytilidae</span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> و از جنس </span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">Modiolus</span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> بود. توالی نوکلئوتیدی و پروتئینی حاصل به ترتیب با شماره</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">های </span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">AB972412.1</span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">BAP16437.1</span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> در بانک اطلاعاتی </span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">NCBI</span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> ثبت گردید. همچنین وزن مولکولی پروتئین</span></span></span></strong> <strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">fp-2</span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> تقریباً معادل 45 کیلو دالتون بود.</span></span></span></strong><br>
<strong><u><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">نتیجهگیری:</span></span></span></u></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> این تحقیق منجر به شناسایی مورفولوژیکی و ژنتیکی صدف دوکفه</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">ای خلیج </span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‎</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">فارس (</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">Modiolus sp.</span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;"> PG</span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> ) و تخلیص پروتئین چسبنده </span></span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">fp-2</span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> گردید. </span></span></span></strong>
<div style="text-align: justify;"><strong><u>Background</u></strong>: Mussel bivalves produce and secrete adhesive proteins which facilitate the adherence to surfaces in the aquatic environments. Specific properties of these proteins such as adhesion, resistance and biocompatibility have introduced their application in biomedical engineering, dental, and production of biological adhesives<span dir="RTL">.</span><br>
<strong><u>Materials and Methods:</u></strong> The species of dwarves from the Persian Gulf were sampled based on the morphologic indexes and COI gene sequence. To identify the polyphenol glands, which produce the adhesive proteins, tissue sections were prepared from the mussel’s foot. Then, the mussel fp-2 protein was purified by the ion-exchange chromatography using salt and pH gradients and, the gel filtration chromatography. To confirm the presence of proteins in each fraction the Arnow test and NBT staining were used. For detection of the protein homogeneity, in each purification stage, the SDS-PAGE electrophoresis was used. The NBT positive chromatogram peaks, after concentration and electrophoresis by Acid-Urea method, were blotted on nitrocellulose and detected by NBT test<span dir="RTL">.</span><br>
<strong><u>Results:</u></strong> The specie morphology and taxonomy were recorded and matched to the FAO criteria and, "The Mollusks of Persian Gulf", the Persian reference book. It belonged to the Mytilidae family and Modiolus genus. The DNA and protein sequences were recorded in NCBI data bank as AB972412.1 and BAP16437.1 respectively. Also, the molecular weight of the purified fp-2 protein was about 45 KD<span dir="RTL">.</span><br>
<strong><u>Conclusion</u></strong><strong>:</strong> This research was led to the morphologic and genetic identification of Modiolus sp. PG from the Persian Gulf along with the purification of the fp-2 adhesive protein.<br>
</div>
پروتئین چسبنده, پروتئین fp-2, ژن COI, صدف Modiolus sp. PG
Adhessive protein, COI gene, Extraction, fp-2 protein, Modiolus sp. PG
481
491
http://ismj.bpums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-18&slc_lang=fa&sid=1
Saba
Hosseini
صبا
حسینی
5700319475328460010097
5700319475328460010097
No
Department of Marine Biology, School of Marine Science and Ocean, Khorramshahr University of Marine Science and Technology, Khorramshahr, Iran
گروه بیولوژی دریا، دانشکده علوم دریایی و اقیانوسی، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر، خرمشهر، ایران
Hossean
Zolgharnine
حسین
ذوالقرنین
Zolgharnine@yahoo.com
5700319475328460010098
5700319475328460010098
Yes
Department of Marine Biology, School of Marine Science and Ocean, Khorramshahr University of Marine Science and Technology, Khorramshahr, Iran
گروه بیولوژی دریا، دانشکده علوم دریایی و اقیانوسی، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر، خرمشهر، ایران
Afshar
Bargahi
افشار
بارگاهی
5700319475328460010099
5700319475328460010099
No
The Persian Gulf Marine Biotechnology Research Center, The Persian Gulf Biomedical Sciences Research Institute, Bushehr University of Medical Sciences, Bushehr, Iran
مرکز تحقیقات زیست فناوری دریایی خلیجفارس، پژوهشکده علوم زیست پزشکی خلیجفارس، دانشگاه علوم پزشکی بوشهر، بوشهر، ایران
Hoda
Khaledi
هدی
خالدی
5700319475328460010100
5700319475328460010100
No
Department of Marine Biology, School of Marine Science and Ocean, Khorramshahr University of Marine Science and Technology, Khorramshahr, Iran
گروه بیولوژی دریا، دانشکده علوم دریایی و اقیانوسی، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر، خرمشهر، ایران
Negin
Salamat
نگین
سلامات
5700319475328460010101
5700319475328460010101
No
Department of Marine Biology, School of Marine Science and Ocean, Khorramshahr University of Marine Science and Technology, Khorramshahr, Iran
گروه بیولوژی دریا، دانشکده علوم دریایی و اقیانوسی، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر، خرمشهر، ایران
Bita
Archangi
بیتا
ارچنگی
5700319475328460010102
5700319475328460010102
No
Department of Marine Biology, School of Marine Science and Ocean, Khorramshahr University of Marine Science and Technology, Khorramshahr, Iran
گروه بیولوژی دریا، دانشکده علوم دریایی و اقیانوسی، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر، خرمشهر، ایران