Iranian South Medical Journal

fa مایع آمنیون حمایت کننده رشد پلاسماسل‌ها Amniotic Fluid that Supports the Growth of Plasma Cells دستگاه خون و لنف Hemic and Lymphatic Systems پژوهشي Original زمینه: مالتیپل میلوما نوعی سرطان پلاسماسل‌های خون می‌باشد که پیشرفت آن بستگی به تعامل بین سلول بدخیم پلاسماسل و ریز محیط مربوطه دارد که توسط گیرنده‌ها تنظیم می‌شود. هر چند چسبندگی اولیه سلول‌ها و مقاومت به آپوپتوز و افزایش ترشح سیتوکین‌ها و فاکتور‌های رشد باعث زنده ماندن، رشد و تکثیر سلول میلوما می‌شود ولی امکان نگهداری سلول‌های میلومایی در محیط آزمایشگاه به راحتی وجود ندارد و با چالش‌های خاصی روبروست و از آنجایی که انجام تحقیقات بر روی میلوما مستلزم بهینه‌سازی و حفظ شرایط کشت آنها در داخل آزمایشگاه می‌باشد، به نظر می‌رسد مایع آمنیوتیک می‌تواند منجر به ارتقا شرایط کشت این سلول‌ها در محیط داخل آزمایشگاه گردد. مواد و روش‌ها: سلول‌های میلومایی 6 بیمار با استفاده از تکنیک MACS جدا شدند. سلول‌ها در محیط کشت شامل RPMI به همراه 100 درصد FBS (فعال و غیرفعال) و غلظت‌های 10، 20 و 50 درصد مایع آمنیوتیک (فعال و غیرفعال) به مدت دو هفته کشت داده شدند. بقای سلولی با استفاده از روش رنگ‌آمیزی تریپان بلو در طی این دو هفته به صورت یک روز در میان اندازه‌گیری شد و در ادامه بیان ژن‌های مربوط به تکثیر (BCL-2)، لانه گزینی (CXCR4) و توقف چرخه سلولی (P27، P21) با استفاده از تکنیک PCR کیفی مورد مطالعه قرار گرفت. یافته‌ها: نتایج نشان داد که محیط شامل 25 درصد مایع آمنیوتیک غیرفعال به همراه 10 درصد FBS غیر فعال به میزان قابل ملاحظه‌ای تکثیر سلول میلوما را افزایش می‌دهد همچنین در روز صفر (روز جداسازی) همه ژن‌های نامبرده بیان شدند. از طرف دیگر، در همه گروه‌ها، در روز چهارم کشت، ژن‌های BCL-2 و CXCR4 بیان داشته، در حالی که ژن‌های P21 و P27 هیچ بیانی نداشتند که می‌تواند نشان دهنده تأثیر مایع آمنیون بر روی رشد و تکثیر سلول‌های میلومایی باشد. نتیجه‌گیری: بر اساس نتایج به‌دست آمده، استفاده از محیط، شامل 25 درصد مایع آمنیوتیک غیرفعال به همراه محیط پایه که شامل RPMI و 10 درصد FBS غیرفعال می‌باشد برای کشت سلول‌های میلوما توصیه می‌شود. <div style="text-align: justify;">Background: Multiple myeloma is a type of plasma cell carcinoma, whose development depends on the interaction between malignant plasma cells and the microenvironment that is regulated by the receptors. Although the initial adhesion of the cells, resistance to apoptosis, and increased secretion of cytokines and growth factors contribute to the survival, growth and proliferation of myeloma cells, maintaining lung cells in the laboratory is not easy and faces certain challenges. Since conducting research on myeloma requires optimizing and maintaining their culture conditions in vitro, it appears that amniotic fluid can promote the culture of these cells in vitro. Materials and Methods: Myeloma cells were isolated from six patients by MACS technique. Cells were cultured in media containing RPMI with 10% FBS (active and inactive) and 10%, 25%, 50% amniotic fluid (active and passive) for 2 weeks. Cell survival was measured every other day using trypan blue staining during these two weeks. Next, the expression of proliferation genes (BCL-2), implantation genes (CXCR4) and cell cycle stop genes (P21, P27) were studied using qualitative PCR technique. Results: The results showed that the medium containing 25% passive amniotic fluid and 10% inactive FBS significantly increased the proliferation of myeloma cells, and on day zero (on the day of isolation) all of these genes were expressed. Furthermore, on the fourth day of cultivation, in all groups, BCL-2 and CXCR4 genes were expressed, while P21 and P27 genes were not. This difference could indicate the effect of amniotic fluid on the growth and proliferation of the myeloma cells. Conclusion: According to the results, the use of a medium containing 25% inactive amniotic fluid plus a base medium that contains active RPMI and FBS 10% is recommended for the culture of myeloma cells.  </div> مایع آمنیون, مالتیپل میلوما, پلاسماسل, تکثیر Amniotic fluid, Multiple myeloma, Plasma cell, Proliferation 304 318 http://ismj.bpums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-62&slc_lang=fa&sid=1 Marzeah Bakhtiari مرضیه بختیاری 5700319475328460010634 5700319475328460010634 No Department of Hematology and Blood Banking, School of Medical Sciences, Tarbiat Modarres University, Teh-ran, Iran گروه هماتولوژی و بانک خون، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران Saeed Kaviani سعید کاویانی kavianis@modares.ac.ir 5700319475328460010635 5700319475328460010635 Yes Department of Hematology and Blood Banking, School of Medical Sciences, Tarbiat Modarres University, Teh-ran, Iran گروه هماتولوژی و بانک خون، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران Saeed Abroon سعید آبرون 5700319475328460010636 5700319475328460010636 No Department of Hematology and Blood Banking, School of Medical Sciences, Tarbiat Modarres University, Teh-ran, Iran گروه هماتولوژی و بانک خون، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران Maryam Moallemi مریم معلمی 5700319475328460010637 5700319475328460010637 No Department of Hematology and Blood Banking, School of Medical Sciences, Tarbiat Modarres University, Teh-ran, Iran گروه هماتولوژی و بانک خون، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران Hasan Jalaei Kho حسن جلالی خو 5700319475328460010638 5700319475328460010638 No Department of Hematology and Blood Banking, School of Medical Sciences, Tarbiat Modarres University, Teh-ran, Iran گروه هماتولوژی و بانک خون، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران