Iranian South Medical Journal
مجله طب جنوب
Iran South Med J
Medical Sciences
http://ismj.bpums.ac.ir
57
journal57
1735-4374
1735-6954
10.52547/ismj
fa
jalali
1397
6
1
gregorian
2018
9
1
21
4
online
1
fulltext
fa
مایع آمنیون حمایت کننده رشد پلاسماسلها
Amniotic Fluid that Supports the Growth of Plasma Cells
دستگاه خون و لنف
Hemic and Lymphatic Systems
پژوهشي
Original
<strong><u><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">زمینه</span></span></u></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">:</span></span></strong> <strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">مالتیپل میلوما نوعی سرطان پلاسماسلهای خون میباشد که پیشرفت آن بستگی به تعامل بین سلول بدخیم پلاسماسل و ریز محیط مربوطه دارد که توسط گیرندهها تنظیم میشود. هر چند چسبندگی اولیه سلولها و مقاومت به آپوپتوز و افزایش ترشح سیتوکینها و فاکتورهای رشد باعث زنده ماندن، رشد و تکثیر سلول میلوما میشود ولی امکان نگهداری سلولهای میلومایی در محیط آزمایشگاه به راحتی وجود ندارد و با چالشهای خاصی روبروست و از آنجایی که انجام تحقیقات بر روی میلوما مستلزم بهینهسازی و حفظ شرایط کشت آنها در داخل آزمایشگاه میباشد، به نظر میرسد مایع آمنیوتیک میتواند منجر به ارتقا شرایط کشت این سلولها در محیط داخل آزمایشگاه گردد.</span></span></strong><br>
<strong><u><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">مواد و روشها</span></span></u></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">:</span></span></strong> <strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">سلولهای میلومایی 6 بیمار با استفاده از تکنیک </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">MACS</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> جدا شدند. سلولها در محیط کشت شامل </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">RPMI</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> به همراه 100 درصد </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">FBS</span></span></strong> <strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">(فعال و غیرفعال) و غلظتهای 10، 20 و 50 درصد مایع آمنیوتیک (فعال و غیرفعال) به مدت دو هفته کشت داده شدند. بقای سلولی با استفاده از روش رنگآمیزی تریپان بلو در طی این دو هفته به صورت یک روز در میان اندازهگیری شد و در ادامه بیان ژنهای مربوط به تکثیر (</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">BCL-2</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">)، لانه گزینی (</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CXCR4</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">) و توقف چرخه سلولی (</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">P27</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">، </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">P21</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">) با استفاده از تکنیک </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">PCR</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> کیفی مورد مطالعه قرار گرفت.</span></span></strong><br>
<strong><u><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">یافتهها</span></span></u></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">:</span></span></strong> <strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">نتایج نشان داد که محیط شامل 25 درصد مایع آمنیوتیک غیرفعال به همراه 10 درصد </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">FBS</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> غیر فعال به میزان قابل ملاحظهای تکثیر سلول میلوما را افزایش میدهد همچنین در روز صفر (روز جداسازی) همه ژنهای نامبرده بیان شدند. از طرف دیگر، در همه گروهها، در روز چهارم کشت، ژنهای </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">BCL-2</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CXCR4</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> بیان داشته، در حالی که ژنهای </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">P21</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">P27</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> هیچ بیانی نداشتند که میتواند نشان دهنده تأثیر مایع آمنیون بر روی رشد و تکثیر سلولهای میلومایی باشد</span></span></strong><span style="font-family:b lotus;">.</span><span style="font-family:b lotus;"></span><br>
<strong><u><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">نتیجهگیری:</span></span></u></strong> <strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">بر اساس نتایج بهدست آمده، استفاده از محیط، شامل 25 درصد مایع آمنیوتیک غیرفعال به همراه محیط پایه که شامل </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">RPMI</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> و 10 درصد </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">FBS</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> غیرفعال میباشد برای کشت سلولهای میلوما توصیه میشود. </span></span></strong>
<div style="text-align: justify;"><strong><u>Background</u></strong>: Multiple myeloma is a type of plasma cell carcinoma, whose development depends on the interaction between malignant plasma cells and the microenvironment that is regulated by the receptors. Although the initial adhesion of the cells, resistance to apoptosis, and increased secretion of cytokines and growth factors contribute to the survival, growth and proliferation of myeloma cells, maintaining lung cells in the laboratory is not easy and faces certain challenges. Since conducting research on myeloma requires optimizing and maintaining their culture conditions in vitro, it appears that amniotic fluid can promote the culture of these cells in vitro.<br>
<strong><u>Materials and Methods:</u></strong> Myeloma cells were isolated from six patients by MACS technique. Cells were cultured in media containing RPMI with 10% FBS (active and inactive) and 10%, 25%, 50% amniotic fluid (active and passive) for 2 weeks. Cell survival was measured every other day using trypan blue staining during these two weeks. Next, the expression of proliferation genes (BCL-2), implantation genes (CXCR4) and cell cycle stop genes (P21, P27) were studied using qualitative PCR technique.<br>
<strong><u>Results:</u></strong> The results showed that the medium containing 25% passive amniotic fluid and 10% inactive FBS significantly increased the proliferation of myeloma cells, and on day zero (on the day of isolation) all of these genes were expressed. Furthermore, on the fourth day of cultivation, in all groups, BCL-2 and CXCR4 genes were expressed, while P21 and P27 genes were not. This difference could indicate the effect of amniotic fluid on the growth and proliferation of the myeloma cells.<br>
<strong><u>Conclusion</u></strong>: According to the results, the use of a medium containing 25% inactive amniotic fluid plus a base medium that contains active RPMI and FBS 10% is recommended for the culture of myeloma cells.<span dir="RTL"></span><br>
</div>
مایع آمنیون, مالتیپل میلوما, پلاسماسل, تکثیر
Amniotic fluid, Multiple myeloma, Plasma cell, Proliferation
304
318
http://ismj.bpums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-62&slc_lang=fa&sid=1
Marzeah
Bakhtiari
مرضیه
بختیاری
5700319475328460010634
5700319475328460010634
No
Department of Hematology and Blood Banking, School of Medical Sciences, Tarbiat Modarres University, Teh-ran, Iran
گروه هماتولوژی و بانک خون، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
Saeed
Kaviani
سعید
کاویانی
kavianis@modares.ac.ir
5700319475328460010635
5700319475328460010635
Yes
Department of Hematology and Blood Banking, School of Medical Sciences, Tarbiat Modarres University, Teh-ran, Iran
گروه هماتولوژی و بانک خون، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
Saeed
Abroon
سعید
آبرون
5700319475328460010636
5700319475328460010636
No
Department of Hematology and Blood Banking, School of Medical Sciences, Tarbiat Modarres University, Teh-ran, Iran
گروه هماتولوژی و بانک خون، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
Maryam
Moallemi
مریم
معلمی
5700319475328460010637
5700319475328460010637
No
Department of Hematology and Blood Banking, School of Medical Sciences, Tarbiat Modarres University, Teh-ran, Iran
گروه هماتولوژی و بانک خون، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
Hasan
Jalaei Kho
حسن
جلالی خو
5700319475328460010638
5700319475328460010638
No
Department of Hematology and Blood Banking, School of Medical Sciences, Tarbiat Modarres University, Teh-ran, Iran
گروه هماتولوژی و بانک خون، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران