fa تولید یک کلون از یاخته‌های پایدار کلیه گوساله و ارزیابی حساسیت آن در برابر ویروس‌های پاراآنفولانزا تیپ سه و هرپس سیمپلکس تیپ یک عمومى General پژوهشي Original <div style="text-align: right"> زمینه: مطالعه حاضر جهت تولید کلون از یاخته‌های مداوم کلیه گوساله و ارزیابی حساسیت کلون های سلولی تولید شده در تکثیر ویروس های پاراآنفولانزا تیپ سه و هرپس سیمپلکس تیپ یک به منظور به کارگیری آن ها در تولید بذر ویروس انجام گرفت. مواد و روش‌ها: در این پژوهش با روش تهیه رقت های متوالی و با بهره‌گیری از رده سلولی Vero غیرفعال شده به عنوان لایه تغذیه کننده اقدام به کلون کردن یاخته‌های رده کلیه گوساله (BK) شد. پس از ظهور کلون های سلولی با حذف لایه تغذیه کننده، سلول های تازه جوانه زده از یک کلون جدا شدند و در شرایط مناسب کشت داده شدند. رده‌ سلولی به دست آمده از لحاظ تکثیر ویروس های هرپس سیمپلکس تیپ یک (به عنوان DNA ویروس) و پاراآنفولانزا تیپ سه (به عنوان RNA ویروس) قبل و بعد از کلون سازی یاخته‌ها مورد ارزیابی قرار گرفتند. یافته‌ها: نتایج حاصل از کلون سازی یاخته های BKدراین تحقیق نشان داد که تغییر عیار ویروس هرپس سیمپلکس تیپ یک بر روی یاخته-های BK (قبل و بعد از کلون‌سازی) معنی‎دار نبود، اما اختلاف تکثیر ویروس پاراآنفولانزا تیپ سه بر روی رده‌ BK-O (قبل از کلون سازی) و BK-C (بعد از کلون سازی) از لحاظ آماری معنی‌دار بود. لذا رده‌های فوق قبل و بعد از کلون سازی از لحاظ کاریولوژی مورد ارزیابی قرار گرفتند و نشان داده شد که سلول های کلون شده نسبت به سلول های کلون نشده هم از نظر مورفولوژی و هم از لحاظ کاریولوژی همگن‌تر هستند. نتیجه گیری: یاخته های کلون شده BK در مقایسه با یاخته های کلون نشده دارای کاریوتیپ منظم‌تر بوده و حساسیت آن به ویروس پاراآنفولانزا تیپ سه کمتر از یاخته کلون نشده بود. </div> Background: Application of continuous cell lines has got a special place in the virological researches. These cells are immortal and their chromosomes are aneuploid. Therefore, they can be passage without any limitation. The aim of this research was to choose the best way of producing clone of cells. Methods: in this study, Bovine Kidney (BK) cell line was used to be cloned through limiting dilution method in which Vero cells were used as feeder layer. Vero cells were first cultured in DMEM supplimented with 7% heat inactivated calf serum and after a monolayer were formed, their growth was arrested by Mitomycin C. The cloned cells after incubation were separated and cultured in a new flask. After several experiments different clones were obtained and cultured for further studies. Results: Karyotype of clone cells were determined and compared with original cells. It was shown that cloned cells were more homogenous in early passages and their karyotypes showed less variability than original ones. Cloned and original cells were inoculated with HSV-1 and Parainfluenza virus 3 in order to evaluate its biological abilities. Tissue culture of infectious dose 50 (TCID50) of each virus was calculated and it was shown that there was no significant different between the HSV-1 titers before and after cloning whereas the titer of the Parainfluenza virus 3 was significantly higher in the original cells. Conclusions: Cloned cells of BK showed more stable karyotype and were less sensitive to parainfluenza type-3 virus infection than original BK cells. کلون‌سازی، یاخته‌های BK، ویروس هرپس سیمپلکس تیپ یک، ویروس پاراآنفولانزا تیپ 3، کاریوتیپ cloning, BK cells, parainfluenza type3, Herpes Simplex Virus Type 1, karyotype 17 23 http://ismj.bpums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3-151&slc_lang=fa&sid=1 Yashar Mohammadzadeh sedigh یاشار محمدزاده صدیق 57003194753284600777 57003194753284600777 No Mohammad hasan Rostaie محمد حسن روستایی 57003194753284600778 57003194753284600778 No Hoorieh Soleiman jahi حوریه سلیمان جاهی Soleim_h@modarres.ac.ir 57003194753284600779 57003194753284600779 Yes Abbas Bakhtyari عباس بختیاری 57003194753284600780 57003194753284600780 No