Iranian South Medical Journal
مجله طب جنوب
Iran South Med J
Medical Sciences
http://ismj.bpums.ac.ir
57
journal57
1735-4374
1735-6954
10.52547/ismj
fa
jalali
1385
6
1
gregorian
2006
9
1
9
1
online
1
fulltext
fa
جداسازی و خالصسازی فراکسیونهای سمی زهر عقرب مزوبوتوس اپیوس
Isolation and purification of toxic fractions from the venom of Mesobuthus eupeus
عمومى
General
پژوهشي
Original
<div style="text-align: right">
زمینه: عقرب مزوبوتوس اپیوس (Mesobuthus eupeus) از عقربهای خانواده بوتیده (Buthidae) بومی ایران به ویژه در منطقه خوزستان میباشد. زهر عقربها به ویژه عقربهای خانواده بوتیده از ترکیبات فعال بیولوژیکی مختلف از جمله انواع توکسینها تشکیل شده است. این توکسینها انواع مختلفی از کانالهای یونی بدن حشرات و یا پستانداران را تحت تأثیر قرار میدهند. جهت مطالعه اجزاء سمی در زهر عقرب ابتدا لازم است این اجزاء خالص شوند، لذا در این مطالعه فراکسیونهای سمی زهر عقرب جداسازی و سمیترین آنها خالص شدند.
روشکار: اجزاء سمی زهر خام عقرب مزوبوتوس اپیوس به وسیله کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون روی سفادکس 50G- در تعادل با بافر استات آمونیوم 20 میلیمولار 7/4=pH جداسازی شد. سپس اجزاء سمیترین فراکسیون بوسیله کروماتوگرافی تعویض یونی کاتیونی جدا شد و خلوص آنها بوسیله الکتروفورز مورد تائید قرار گرفت.
یافتهها: از 816 میلیگرم پروتئین زهر خام که روی ستون سفادکس 50G- برده شد، 815 میلیگرم پروتئین در 6 فراکسیون تفکیک شده بدست آمد. فراکسیونهای III و IV برای موشها اثر سمی داشتند و50LD (Lethal Dose 50) آنها به ترتیب 40/0 و 46/0 میلیگرم بر کیلوگرم بدست آمد. فراکسیون سوم به 20 زیرفراکسیون تفکیک شد، که با بررسی سمیت آنها بر روی موشها مشخص گردید که زیرفراکسیونهای III.14 تا III.19 دارای اثر سمی بودند. از 250 میلیگرم پروتئین فراکسیون III که روی ستون برده شد، 75/242 میلیگرم (97 درصد) در زیرفراکسیونهای تفکیک شده بدست آمد. زیرفراکسیون III.14.2، III.14.3 و III.14.4 برای موشها سمی بودند.
نتیجهگیری: در این مطالعه سه توکسین به صورت خالص بدست آمد. توکسین III.14.4 با 50LD برابر با 11/0 میلیگرم بر کیلوگرم وزن بدن موش، بیشترین سمیت را دارا بود. از این سه توکسین خالص میتوان در تحقیقات بعدی در تهیه آنتی سرم و یا مطالعه خصوصیات ساختمانی و اثرات فیزیولوژی فارماکولوژی استفاده نمود.
</div>
Background: Mesobuthus eupeus of the buthidae scorpion family is a native species in Iran (especially in Khuzestan region). The venom of scorpions, particularly buthidae family, is mainly composed of various bioactive components including various toxins. These toxins affect different ionic channels in excitable membranes of insects or mammals. In this study, the toxic fractions of Mesobuthus eupeus crude venom were isolated and those with higher toxicity were purified. Methods: Six toxic fractions from the crude venom of Mesobuthus eupeus were separated by gel filtration chromatography on sephadex G-50 in the equilibration with 20 mM ammonium acetate buffer, pH 4.7. Then the most toxic fractions were separated by cation exchange column chromatography and their purity was confirmed by electrophoresis. Results: The amount of 816 mg protein of soluble crude venom was applied on sephadex G-50 column chromatography, and 815 mg protein was yielded from the 6 separated fractions. From these fractions, fractions III and IV were toxic to mice. The LD50 values (Lethal Dose 50) of them were 0.40 and 0.46 mg/kg in mice, respectively. Fraction III was separated into 20 distinct subfractions. Through examining the toxicity of those subfractions to the mice, the toxic effect of subfractions III.14 to III.19 on mice was detected. From 250 mg protein of fraction III, applied on CM-sephadexC-25, 242.75 mg (97%) protein was attained in the separated subfractions. Conclusion: Three distinct toxins were obtained in pure form from the venom of Mesobuthus eupeus. The subfraction III.14.4 with an LD50 of 0.11 mg/kg in mice had the highest toxicity. The structural characteristics, physiological and pathological effects of these three purified toxin subfractions can be studied in the future studies.
مزوبوتوس اپیوس، زهر، عقرب، توکسین
Mesobuthus eupeus, venom, scorpion, toxin
9
19
http://ismj.bpums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3-40&slc_lang=fa&sid=1
Manijeh
Kadkhodaie
منیژه
کدخدایی
kadkhodaeim@hotmail.com
57003194753284600213
57003194753284600213
Yes
Hossain
hanifi
حسین
حنیفی
57003194753284600214
57003194753284600214
No
Zohreh
Amoozegary
زهره
آموزگاری
57003194753284600215
57003194753284600215
No