fa بررسی توالی نوکلئوتیدی ژن ethA در سویه‌های حساس و مقاوم به اتیونامید در باکتری مایکوباکتریوم توبرکلوزیس میکروب‌شناسی و ایمنولوژی Microbiology and Immunology پژوهشي Original <p><u><strong>زمینه:</strong></u> اتیونامید (ETH) یک آنالوگ ساختاری از ایزونیازید و از داروهای خط دوم در درمان بیماری سل می‌باشد. اتیونامید و ایزونیازید پروتئین INHA را در باکتری مایکوباکتریوم توبرکلوزیس (MTB) هدف قرار می‌دهند. این پروتئین در بیوسنتز اسیدمایکولیک دیواره نقش دارد. هدف از این مطالعه بررسی ترادف ژن ethA به‌منظور شناسایی موتاسیون‌های مرتبط با مقاومت به اتیونامید در مایکوباکتریوم توبرکلوزیس است.</p> <p><u><strong>مواد و روش‌ها:</strong></u> در این مطالعه توالی نوکلئوتیدی در 27 سویه کلینیکی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس مقاوم و حساس به اتیونامید مورد ارزیابی قرار گرفت. با توجه به طویل بودن قطعه (1470 bp) جهت تعیین ترادف کامل ژن، از مجموعه پرایمرهای اختصاصی 10-ethA، 8-ethA، 9-ethA، 4-ethA، 5-ethA، 1- ethAبرای تولید سه قطعه‌ای که همپوشانی دارند در واکنش PCR، استفاده شد. به ازای هر نمونه سه واکنش PCR با پرایمرهای اختصاصی 10-ethA، 8-ethA، 9-ethA، 4-ethA، 5-ethA، 1- ethA اجرا شد.</p> <p><u><strong>یافته‌ها:</strong></u> از 27 سویه مورد بررسی، 23 سویه مقاوم به اتیونامید و 4 سویه حساس به دارو بودند. نتایج الکتروفورز نشان دهنده‌ی انتخاب مناسب پرایمرها و برنامه PCR بود. نتایج تعیین توالی، رخداد موتاسیون را در نقاط مختلف ژن، در سویه‌های مقاوم مورد مطالعه اثبات کرد. سویه‌های حساس نیز همگی فاقد موتاسیون بودند.</p> <p><u><strong>نتیجه‌گیری:</strong></u> نتایج این مطالعه نشان داد که هرگونه جهش در هر نقطه از ژن ethA میتواند منجر به مقاومت به اتیونامید شود. تشخیص مولکولی سریع مقاومت از طریق توالی یابی کل ژن امکان پذیر است.</p> <p><strong><u>Background:</u></strong> Ethionamide (ETH) is a structural analog of isoniazid and secondary line anti-tuberculosis drugs. Both of Ethionamide and isoniazid target INHA protein in mycobacterium tuberculosis. This protein involved in mycolic acid biosynthesis. The purpose of this study is evaluation of sequence of ethA gene in order to detect mutations related to resistance to isoniazide in clinical mycobacterium tuberculosis isolates.</p> <p><strong><u>Material and Methods:</u></strong> In this study were evaluated 27 resistance and sensitive isolates to ethionamide. Because of length of this fragment (1470bp) were performed three reactions for each sample with ethA-10, ethA-8, ethA-9, ethA-4, ethA-5 and ethA-1 specific primers in PCR reaction.</p> <p><strong><u>Results:</u></strong> From 27 used clinical isolates, 23 strains were resistant and 4 isolates were susceptible to ETH. Results of electrophoresis were proved proper selection of primers and PCR conditions. DNA sequencing results were determined mutations at some points of the gene in the resistant isolates to ETH, but none of susceptible strains harbored mutations.</p> <p><strong><u>Conclusion:</u></strong> According to the results it was proved that any mutations in each point of ethA gene could cause resistance to Ethionamid. Rapid molecular detection of the resistance is possible only via complete sequencing of total length of this gene.</p> مایکوباکتریوم توبرکلوزیس, مقاومت دارویی, اتیونامید, تعیین توالی Mycobacterium tuberculosis, Drug resistant, Ethionamide, sequencing 1153 1159 http://ismj.bpums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3-545&slc_lang=fa&sid=1 Somaye Moazemi سمیه معظمی 570031947532846008028 570031947532846008028 No Microbiology Department, Faculty of Science, Islamic Azad University of Arak, Arak, IRAN گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم، دانشگاه آزاد اسلامی واحد اراک، اراک، ایران Mohammad Arjomandzadegan محمد ارجمندزادگان arjomandzadegan@arakmu.ac.ir 570031947532846008029 570031947532846008029 Yes Department of microbiology, Tuberculosis and Pediatric Infectious Disease Research Center , Arak University of Medical Sciences,Arak, IRAN مرکز تحقیقات سل و عفونی کودکان، گروه میکروبیولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران Azam Ahmadi اعظم محمدی 570031947532846008030 570031947532846008030 No Tuberculosis and Pediatric Infectious Disease Research Center, Arak, Department of Molecular Genetics, Faculty of Biological Science, Tarbiat Modares University, Tehran, IRAN مرکز تحقیقات سل و عفونی کودکان، گروه ژنتیک مولکولی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران Maryam Tayebun مریم طیبون 570031947532846008031 570031947532846008031 No Microbiology Department, Faculty of Science, Islamic Azad University of Arak, Arak, IRAN گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم، دانشگاه آزاد اسلامی واحد اراک، اراک، ایران Mana Shojapor مانا شجاع پور 570031947532846008032 570031947532846008032 No Research Center of Molecular Medicine, University of Medical Sciences, Arak, IRAN مرکز تحقیقات پزشکی و مولکولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران