1- گروه مهندسی ژنتیک، پژوهشکده فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران 2- گروه مهندسی ژنتیک، پژوهشکده فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران ، zeinoddini52@mut.ac.ir 3- دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران
چکیده: (5461 مشاهده)
زمینه: اکورین فوتوپروتئینی حساس به کلسیم است که از آپوآکورین (189 اسید آمینه)، اکسیژن و کوالنترازین (کروموفور ایمیدازوپیرازین) تشکیل شده است. عملکرد این پروتئین نوری در حضور کلسیم، نشر نور آبی (469 نانومتر) است. مطالعات نشان داده است که سه اسید آمینه H16، Y82 و W86 در عملکرد و شیفت نوری پروتئین اکورین نقش دارد. در تحقیق حاضر به منظور بررسی ارتباط ساختار- عملکرد پروتئین از جهشهای ترکیبی استفاده شد تا نقش و اهمیت جایگاههای مورد نظر، در حالت تک و ترکیبی، بهدست آید. مواد و روشها: با استفاده از روش جهشهای هدفمند، جهشهای تکی و ترکیبی در پلاسمید مورد نظر انجام گرفت و فوتوپروتئین اکورین در حالات تک جهشی و جهشهای ترکیبی، بهدست آمد. در مرحله بعد پایداری حرارتی و فعالیت نوری پروتئینهای بهدست آمده با استفاده از لومینومتر، اندازهگیری و شیفت نوری آنها با استفاده از اسپکتروفلوریمتر، اندازهگیری شد. یافتهها: نتایج حاصله نشان داد که نقش جایگاه W86 در شیفت نوری و نقش H16 در عملکرد از سایر موقعیتهای دیگر بالاتر است. همچنین پایداری حرارتی جهش اعمال شده در موقعیت W86 نسبت به سایر جهشها عملکرد بهتری را نشان میدهد. نتیجهگیری: این تحقیق نشان داد که جایگاه اسید آمینه W86 در شیفت نوری و پایداری حرارتی اکورین، از Y82 و H16 بالاتر است و میتوان از این جهش جهت تولید پروتئین کاراتر در راستای حسگری و سایر کاربردهای مربوطه استفاده نمود.
Ghanbartalab F, Zeinoddini M, Hosseinkhani S, Esmailinejad M, Hosseini S, Laali M. The role of His 16, Tyr 82 and Trp 86 in color shift, activity and thermostability of aequorin photoprotein. Iran South Med J. 2015; 18 (1) :37-45 URL: http://ismj.bpums.ac.ir/article-1-646-fa.html
قنبرطلب فائزه، زین الدینی مهدی، حسین خانی سامان، اسماعیل نژاد معصومه، حسینی سیده الهه، لالی معصومه. نقش اسیدهای آمینه هیستیدین 16، تیروزین 82 و تریپتوفان 86 در شیفت نوری، فعالیت و پایداری حرارتی فوتوپروتئین اکورین. طب جنوب. 1394; 18 (1) :37-45
Iranian South Medical Journal is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License which allows users to read,
copy, distribute and make derivative works for non-commercial purposes from the material, as long as the author of the original work is cited properly